Δοκιμή ρετροϊών

Μέθοδοι ανίχνευσης

Αρχές Μεθόδου

Ρυθμιστική εστίαση

Δοκιμασία συγκαλλιέργειας

Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί ευαίσθητα κύτταρα δείκτες για τη σύλληψη μολυσματικών ιικών σωματιδίων και καθορίζει την κατάσταση μόλυνσης παρατηρώντας φαινόμενα όπως κυτταροπαθητικά αποτελέσματα, εστιακός σχηματισμός ή έκφραση ειδικής αντιγόνου. Μπορεί να δείξει την παρουσία μολυσματικών ρετροϊικών σωματιδίων.

• Mandatory testing targets: EOPC cells or production-limited passage cells.

• Διαδικασία δοκιμής πυρήνα: Πρέπει να χρησιμοποιηθεί ένα-σύστημα-συν-καλλιέργειας δύο σταδίων (φάση ενίσχυσης ιού και φάση δείκτη δραστηριότητας).

• Απαιτήσεις ευαίσθητων κυττάρων: Ανάλογα με το είδος και την προέλευση των κυττάρων που ελέγχονται, πρέπει να χρησιμοποιούνται διαφορετικές ή πολλαπλές ευαίσθητες κυτταρικές σειρές για δοκιμές μολυσματικότητας ρετροϊού.

• Απαιτήσεις μεταβίβασης πολιτισμού: Το σύστημα συν{0}}συγκαλλιέργειας πρέπει να περάσει τουλάχιστον 5 φορές (συνήθως περισσότερες) για να διασφαλιστεί η επαρκής ενίσχυση του πιθανού ιού.

Ηλεκτρονική μικροσκοπία μετάδοσης

Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιεί ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μετάδοσης υψηλής ανάλυσης{{0} για την άμεση παρατήρηση της μορφολογίας και της δομής των σωματιδίων του ιού (όπως η τυπική δομή εικοσαεδρικού περιβλήματος και η μορφολογία νουκλεοκαψιδίου), επιτρέποντας οπτική αναγνώριση και ποσοτική ανάλυση. Μπορεί να ανιχνεύσει γνωστά και άγνωστα ιικά σωματίδια, συμπεριλαμβανομένων μη-σωματιδίων που δεν αναπαράγονται ή εκείνων που δεν έχουν συλληφθεί από δοκιμές μολυσματικότητας.

• Υποχρεωτικοί στόχοι δοκιμών: κύτταρα EOPC ή κύτταρα περιορισμένης διέλευσης-.

• Βασική απαίτηση: Πρέπει να προσδιοριστεί ο τύπος και η ποσότητα των σωματιδίων ρετροϊού.

• Απαιτήσεις δειγμάτων: Απαιτείται εξαιρετικά λεπτή τομή, που συνήθως απαιτεί συστηματική παρατήρηση τουλάχιστον 200 κυττάρων.

• Ειδικές διατάξεις (Κινεζική Φαρμακοποιία 2025): Για ορισμένα κύτταρα τρωκτικών (π.χ. CHO, BHK-21) ή κύτταρα εντόμων, θα πρέπει επίσης να προσδιοριστεί η ποσότητα των ιικών σωματιδίων στο υγρό συλλογής και η μολυσματικότητά τους.

Δοκιμασία Αντίστροφης Μεταγραφάσης

Με βάση το χαρακτηριστικό της αντίστροφης μεταγραφάσης που καταλύει τη σύνθεση του DNA από ένα εκμαγείο RNA, η παρουσία ρετροϊών μπορεί να προσδιοριστεί έμμεσα ανιχνεύοντας τα ραδιενεργά ή φθορίζοντα σήματα των προϊόντων αντίδρασης για την ποσοτικοποίηση της ενζυμικής δραστηριότητας. Αυτή η μέθοδος είναι ανεξάρτητη από τη μολυσματικότητα του ιού και μπορεί να ελέγξει ευρέως για ιικά σωματίδια με ενζυματική δραστηριότητα.

• Εξαίρεση εξαίρεσης: Τόσο το ICH Q5A(R2) όσο και η Κινεζική Φαρμακοποιία (Έκδοση 2025) δηλώνουν ξεκάθαρα ότι αυτή η δοκιμή δεν απαιτείται για κύτταρα που είναι γνωστό ότι παράγουν ρετροϊούς (όπως ορισμένα κύτταρα τρωκτικών, εντόμων και πτηνών).

• Εναλλακτικές Απαιτήσεις: Σε περιπτώσεις εξαίρεσης, πρέπει να πραγματοποιηθεί μια πιο ολοκληρωμένη δοκιμή για τον τύπο, την ποσότητα και τη μολυσματικότητα των σωματιδίων του ιού.

PCR ή άλλες ειδικές in vitro μεθόδους

Με βάση την εξειδίκευση του είδους των κυττάρων, όταν τα αποτελέσματα της δραστηριότητας της αντίστροφης μεταγραφάσης είναι ασαφή ή δεν μπορούν να μετρηθούν, μπορούν να χρησιμοποιηθούν ειδικές μέθοδοι ανίχνευσης ειδών ρετροϊών, όπως PCR ρετροϊού, ανοσοφθορισμός, ELISA, κ.λπ. Ποσοτική PCR ρετροϊών μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για τον ποσοτικό προσδιορισμό των ρετροϊών.

• Πρωτεύουσα τοποθέτηση: Συνήθως χρησιμοποιείται ως σημαντικό συμπλήρωμα στις βασικές μεθόδους που αναφέρονται παραπάνω και ως εργαλείο για την επιβεβαίωση της ειδικότητας.

• Σενάρια εφαρμογής: Χρησιμοποιούνται συνήθως για την ανίχνευση και την ποσοτικοποίηση συγκεκριμένων γνωστών ιών με υψηλή ευαισθησία (π.χ. qPCR) ή για την παροχή στοιχείων σε μοριακό-επίπεδο όταν τα αποτελέσματα μολυσματικότητας/ηλεκτρονικής μικροσκοπίας είναι αμφισβητήσιμα.

• Ρυθμιστική βάση: Η εφαρμογή του απαιτεί ενδελεχή επικύρωση και πρέπει να συμμορφώνεται με τις σχετικές οδηγίες για την επικύρωση συγκεκριμένων μεθόδων ανίχνευσης στην αγορά-στόχο (π.χ. Κινεζική Φαρμακοποιία (Έκδοση 2025)).

Επαγγελματικές υπηρεσίες

Ολοκληρωμένη προστασία για εσάς

Παγκόσμια Προσέγγιση Συμμόρφωσης

Οι μέθοδοι δοκιμών μας είναι βαθιά ενσωματωμένες με τις βασικές απαιτήσεις του ICH Q5A(R2), της Κινεζικής Φαρμακοποιίας (2025), του USP και του EP, παρέχοντας μια-υπηρεσία μίας στάσης που καλύπτει δοκιμές μολυσματικότητας, ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μετάδοσης (TEM) και ανίχνευση δραστηριότητας αντίστροφης μεταγραφάσης, υποστηρίζοντας αποτελεσματικά την ταυτόχρονη εφαρμογή στις ΗΠΑ, στην Κίνα και στην Ευρώπη.

Δυνατότητα ανίχνευσης ευρέος-φάσματος

Έχουμε μια ποικιλία ευαίσθητων κυτταρικών σειρών και ώριμων μεθόδων για διαφορετικά σενάρια κινδύνου, που μπορούν να ανιχνεύσουν αποτελεσματικά παθογόνα-στόχους, συμπεριλαμβανομένων ρετροϊών ποντικών, ρετροϊών τροπισμού και ρετροϊών εντόμων, διασφαλίζοντας το ευρύ φάσμα και την ειδικότητα της ανίχνευσης.

Δική πλατφόρμα ηλεκτρονικής μικροσκοπίας

Διαθέτουμε το δικό μας ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μετάδοσης υψηλής ανάλυσης-και μια ανώτερη επαγγελματική τεχνική ομάδα για την επίτευξη ποιοτικού ελέγχου κλειστού-βρόχου καθ' όλη τη διάρκεια της διαδικασίας από την προετοιμασία του δείγματος έως την έξοδο δεδομένων. Μπορούμε επίσης να παρέχουμε γρήγορες ποσοτικές υπηρεσίες για πρώτες ύλες (UPB) για την ακριβή υποστήριξη της επαλήθευσης εκκαθάρισης ιών κατάντη.

Ολοκληρωμένη επικύρωση μεθόδου

Όλες οι μέθοδοι εκτελούνται σύμφωνα με τα πρότυπα GMP/GLP, τηρώντας αυστηρά την Κινεζική Φαρμακοποιία (Έκδοση 2025) και την ICH Q2(R2) για ολοκληρωμένη επικύρωση της ειδικότητας, των ορίων ανίχνευσης κ.λπ.

Προστασία ακεραιότητας δεδομένων

Από την παραλαβή του δείγματος και την εκτέλεση πειράματος μέχρι την έκδοση αναφορών, έχουμε δημιουργήσει ένα πλήρες σύστημα ποιότητας που συμμορφώνεται με τις αρχές GMP και ALCOA+. Μέσω της επαγγελματικής-επισκόπησης δεδομένων πολλαπλών επιπέδων και ενός ισχυρού μηχανισμού ελέγχου απόκλισης (CAPA), διασφαλίζουμε ουσιαστικά την υψηλή-ποιότητα και την ελεγχόμενη παράδοση για κάθε έργο.