Ανίχνευση βακτηριακής ενδοτοξίνης
Προσφέρουμε υπηρεσίες ελέγχου βακτηριακής ενδοτοξίνης. Οι μέθοδοι δοκιμών μας πληρούν όλες τις απαιτήσεις της φαρμακοποιίας (USP85, ChP1143), συμπεριλαμβανομένων των μεθόδων δοκιμής ενδοτοξίνης γέλης-θρόμβου TAL και LAL. Παρέχουμε επίσης πειράματα επικύρωσης παρεμβολών και υπηρεσίες τεχνικής υποστήριξης για τους πελάτες μας.
Άσηπτη εξέταση
Οι μέθοδοι άμεσου εμβολιασμού και διήθησης με μεμβράνη είναι κλασικές δοκιμές στειρότητας για προϊόντα, σχεδιασμένες να διασφαλίζουν την απουσία βιώσιμων μολυσματικών μικροοργανισμών. Αυτές οι δοκιμές πραγματοποιούνται σε περιβάλλον απομόνωσης ή καθαρού δωματίου. Οι μέθοδοι δοκιμών μας πληρούν όλες τις απαιτήσεις της φαρμακοποιίας (USP71, ChP1101).
• Τα δείγματα δοκιμής εμβολιάζονται απευθείας σε δύο μέσα καλλιέργειας για την ανίχνευση αερόβιων και αναερόβιων μικροοργανισμών.
• Μετά τον ενοφθαλμισμό, και τα δύο μέσα καλλιέργειας επωάζονται για 14 ημέρες. Πραγματοποιούνται διαλείπουσα παρατήρηση και μια τελική παρατήρηση στο τέλος της δοκιμαστικής περιόδου για την ανίχνευση ενδείξεων μικροβιακής ανάπτυξης.
• Η αποστειρωμένη κλειστή συσκευή διήθησης επιτρέπει το φιλτράρισμα ίσων όγκων δειγμάτων δοκιμής ταυτόχρονα μέσω δύο φίλτρων μεμβράνης.
• Τα δείγματα επωάζονται σε δύο μέσα καλλιέργειας για 14 ημέρες για να διευκολυνθεί η ανίχνευση αερόβιων και αναερόβιων μικροοργανισμών.
Έλεγχος μυκοπλάσματος
Η μόλυνση από μυκόπλασμα είναι ένα κοινό πρόβλημα στην κυτταροκαλλιέργεια. Περιπλέκοντας περαιτέρω τα πράγματα, οι προσμείξεις μπορούν να αυξηθούν σε υψηλούς τίτλους χωρίς να παρουσιάζουν θολότητα ή κυτταροπαθητικά αποτελέσματα, καθιστώντας την ανίχνευση ιδιαίτερα δύσκολη. Τα κυτταρικά υποστρώματα που χρησιμοποιούνται στη βιοφαρμακευτική παραγωγή πρέπει να είναι αποδεδειγμένα απαλλαγμένα από τυχαίους παράγοντες, συμπεριλαμβανομένου του μυκοπλάσματος. Ο έλεγχος μυκόπλασμα πρέπει να εκτελείται σε όλα τα στάδια ανάπτυξης του προϊόντος, συμπεριλαμβανομένων των πρώτων υλών, των τραπεζών κυττάρων, των αποθεμάτων σπόρων ιού, των μη επεξεργασμένων υλικών που έχουν συγκομιστεί χύμα και των τελικών προϊόντων.
Μέθοδος άμεσης καλλιέργειας
Τα δείγματα δοκιμής εμβολιάζονται απευθείας σε πλάκες άγαρ/ημι-ρευστά μέσα και υγρά μέσα.
Το επιλεγμένο άγαρ/ημι-ρευστό και υγρό μέσο έχει αποδειχθεί ότι έχουν καλή ανάπτυξη-που προάγουν τις ιδιότητες που υποστηρίζουν την ανάπτυξη πολλαπλών ειδών μυκοπλάσματος.
Κάθε δοκιμή ανίχνευσης μυκοπλάσματος περιλαμβάνει αρνητικούς και θετικούς μάρτυρες για την επαλήθευση της καταλληλότητας του συστήματος δοκιμής.
Κατά τη διάρκεια της περιόδου επώασης, οι υγρές καλλιέργειες υποκαλλιεργούνται σε πολλαπλά χρονικά σημεία για να παρατηρηθεί η ανάπτυξη μυκοπλάσματος.
Στο τέλος της περιόδου επώασης, η μόλυνση από μυκόπλασμα αξιολογείται παρατηρώντας την παρουσία αποικιών μυκοπλάσματος σε πλάκες άγαρ ή την αλλαγή χρώματος του υγρού μέσου.
Η συνολική περίοδος επώασης είναι 28 ημέρες.
Μέθοδος κυτταροκαλλιέργειας δείκτη
Ορισμένα στελέχη μυκοπλάσματος θεωρούνται "μη καλλιεργήσιμα" επειδή δεν αναπτύσσονται σε τυπικά μέσα καλλιέργειας. Καλλιέργειες κυττάρων Vero μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον εμπλουτισμό αυτών των στελεχών μυκοπλάσματος. Μετά από περίοδο καλλιέργειας μίας-εβδομάδας, τα κύτταρα σταθεροποιούνται, χρωματίζονται με φθορίζουσες βαφές που δεσμεύουν το DNA-και αξιολογούνται υπό μικροσκόπιο.
Σε περιπτώσεις μόλυνσης από μυκόπλασμα, ένα χαρακτηριστικό μοτίβο έντονου φθορισμού εμφανίζεται στην κυτταρική επιφάνεια και στη γύρω περιοχή όταν η μόλυνση είναι σοβαρή.
Τα προϊόντα πρωτεΐνης, πεπτιδίου, φορέα και πλασμιδίου είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα σε περιβαλλοντικούς παράγοντες. Οι μελέτες δοκιμών σταθερότητας χρησιμοποιούνται για την αξιολόγηση της απόδοσης των βιοφαρμακευτικών προϊόντων κάτω από διαφορετικές περιβαλλοντικές συνθήκες εντός συγκεκριμένου χρονικού πλαισίου. Τα αποτελέσματα καθορίζουν τις συνιστώμενες συνθήκες αποθήκευσης και μεταφοράς για φάρμακα και προϊόντα και προσδιορίζουν τις κατάλληλες περιόδους διατηρησιμότητας-ή επανεξέτασης.
Δοκιμές σταθερότητας σε πραγματικό-χρόνο και επιτάχυνση
Η διάρκεια ζωής υπολογίζεται συνήθως με βάση τα αποτελέσματα-δοκιμών σταθερότητας σε πραγματικό χρόνο και επιταχυνόμενης δοκιμής σταθερότητας. Σε-δοκιμές σταθερότητας σε πραγματικό χρόνο, το προϊόν αποθηκεύεται υπό τις συνιστώμενες συνθήκες αποθήκευσης και παρακολουθείται συνεχώς μέχρι να μην πληροί τις προδιαγραφές του προϊόντος. Σε δοκιμές επιταχυνόμενης σταθερότητας, το προϊόν αποθηκεύεται υπό συνθήκες αυξημένης καταπόνησης (π.χ. αυξημένη θερμοκρασία και/ή υγρασία). Η υποβάθμιση υπό τις συνιστώμενες συνθήκες αποθήκευσης μπορεί στη συνέχεια να προβλεφθεί χρησιμοποιώντας τη γνωστή σχέση μεταξύ του συντελεστή επιτάχυνσης και του ρυθμού των προφίλ υποβάθμισης.
Μελέτες Αναγκαστικής Υποβάθμισης
Οι μελέτες αναγκαστικής αποδόμησης διεξάγονται μέσω μελετών σταθερότητας υπό ακραίες συνθήκες αποθήκευσης για την επιτάχυνση των ρυθμών αποδόμησης. Λόγω της μη γραμμικής φύσης της κινητικής αποικοδόμησης πρωτεϊνών, αυτές οι μελέτες έχουν περιορισμένη προγνωστική αξία για τη διάρκεια ζωής στα βιοφαρμακευτικά προϊόντα. Ωστόσο, οι μελέτες αναγκαστικής αποδόμησης είναι ιδιαίτερα χρήσιμες σε πρώιμο-στάδιο ανάπτυξης φαρμάκων, επειδή παρέχουν πληροφορίες σχετικά με τις οδούς κατανομής και αποδόμησης του προϊόντος, επιτρέποντας τη βελτιστοποίηση της σύνθεσης και βοηθώντας στον καθορισμό των συνθηκών αποθήκευσης για τον έλεγχο της σταθερότητας του προϊόντος.
Μακροπρόθεσμες-Μελέτες σταθερότητας
Για τα βιοφαρμακευτικά προϊόντα, διεξάγονται-μακροπρόθεσμες μελέτες σταθερότητας υπό αναμενόμενες συνθήκες αποθήκευσης, ενώ βραχυπρόθεσμες-μελέτες σε υψηλότερες θερμοκρασίες για υποστήριξη-αξιολογήσεων σταθερότητας χρήσης και υπό συνθήκες μεταφοράς.