Αναγνώριση κυτταρικής γραμμής και τράπεζας κυττάρων
Η ταυτοποίηση της κυτταρικής γραμμής και της τράπεζας κυττάρων αποτελεί κανονιστική απαίτηση. Οι κυτταρικές σειρές και οι τράπεζες κυττάρων που χρησιμοποιούνται σε φάρμακα αντισωμάτων, πρωτεϊνικά φάρμακα και προϊόντα κυτταρικής θεραπείας πρέπει να διασφαλίζουν την ποιότητα, την καθαρότητα και την ασφάλειά τους. Η σωστή αναγνώριση κυτταρικής σειράς και τράπεζας κυττάρων είναι ζωτικής σημασίας για την παραγωγή βιοφαρμακευτικών προϊόντων.
Μέθοδοι αναγνώρισης κυτταρικής γραμμής και τράπεζας κυττάρων
Η αναγνώριση γραμμών κινητής και τράπεζας κυττάρων στοχεύει κυρίως τις κύριες τράπεζες κυττάρων (MCB) και τις τράπεζες εργασίας κυττάρων (WCB). Επιπλέον, οι τράπεζες ερευνητικών κυττάρων (RCB) συνήθως υποβάλλονται σε ελέγχους μυκοβακτηριδίων και στειρότητας πριν ενσωματωθούν σε εγκαταστάσεις GMP για παραγωγή MCB. Οι κατασκευαστές μπορούν επίσης να ζητήσουν συγκεκριμένο τεστ για ιούς.
Σύμφωνα με τους ισχύοντες κανονισμούς (π.χ., ICH Q5A/Q5B/Q5D), η αναγνώριση κυτταρικής σειράς και κυτταρικής τράπεζας περιλαμβάνει κυρίως τις ακόλουθες πτυχές: ταυτοποίηση κυττάρων, δοκιμή στειρότητας, δοκιμή μυκόπλασμα, δοκιμή ενδογενούς και εξωγενούς ιικής μόλυνσης και δοκιμή ογκογένεσης. Τα στοιχεία και οι μέθοδοι δοκιμής που παρέχονται από την HyQure Biotech περιγράφονται παρακάτω:
|
Δοκιμαστικά είδη |
Μέθοδοι ανίχνευσης |
|
|
Αναγνώριση κυττάρων |
Ισοένζυμα, CO1, STRs, ταυτοποίηση ειδών |
|
|
Βακτηριακή και μυκητιακή εξέταση |
Διήθηση μεμβράνης, άμεσος εμβολιασμός και μέθοδος αναπνευστικού σήματος |
|
|
Τεστ μυκοπλάσματος |
Μέθοδος άμεσης καλλιέργειας, μέθοδος κυτταροκαλλιέργειας δείκτη, μέθοδος qPCR (για δοκιμή μυκόπλασμα και σπειροπλάσματος) |
|
|
Τεστ μυκοβακτηριδίου |
Μέθοδος καλλιέργειας, μέθοδος qPCR |
|
|
Δοκιμή εξωγενών και ενδογενών ιικών παραγόντων |
Παρατήρηση μορφολογίας κυττάρων και προσρόφηση αίματος |
Παρατήρηση μορφολογίας κυτταροκαλλιέργειας και δοκιμή προσρόφησης αίματος |
|
In vitro σπορά διαφορετικών κυττάρων δεικτών |
Εξέταση κυτταροπαθητικού αποτελέσματος |
|
|
In vivo εμβολιασμός ζώων και εμβρυϊκών αυγών κότας |
Εμβρυωμένα αυγά κότας, θηλάζοντα & ενήλικα ποντίκια κ.λπ. |
|
|
Τεστ ρετροϊού |
Δοκιμή μολυσματικότητας, ηλεκτρονική μικροσκοπία, δραστηριότητα αντίστροφης μεταγραφάσης (TEM-PERT) |
|
|
Δοκιμή ιών-ειδών |
Ποντίκι-προέρχεται, άνθρωπος-προερχόμενος, μαϊμού-προερχόμενος |
|
|
Δοκιμή ιού βοοειδών |
Εξέταση κυτταροπαθητικού αποτελέσματος, μέθοδος qPCR |
|
|
Δοκιμή ιού χοίρου |
Εξέταση κυτταροπαθητικού αποτελέσματος, μέθοδος qPCR |
|
|
Άλλα ειδικά τεστ ιών |
Δοκιμή παρβοϊού ποντικιού κ.λπ. |
|
|
Εξέταση ογκογένεσης |
Πειράματα σε ζώα |
|